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PCR实验室建立方法?

来源:http://www.thnhjgc.com/news413546.html   发布时间:2020-07-07 14:31:00

PCR实验室建立方法?

1、建立样品准备区

这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该选用预防措施:⑴PCR产品和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。⑵组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理,以根据运用的需求提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的东西不能被用作一般分子克隆的东西,也不能用作操作靶序列。⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在罗致样品时有气溶胶留传。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管罗致。⑹管子翻开前都要简略离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿试验服和带手套,手套要常常替换,尤其在抽提进程中每一步之间都要替换。试验服要专门用于样品准备间,常常清洗。
2、样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额定进程需求额定的样品操作,这样增加了样品之间污染的时机。为了防止这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中运用UNG以防止污染的方法也有报道。
3、建立前PCR区。
该去专门用于准备各种反应,这个区域有必要坚持洁净,而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区有必要要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。


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